Michaelis Menten (veja também o anexo)

Cada reacção tem sua própria velocidade V com o seu próprio constante de velocidade k



Com três pressupostos que criam uma situação ideal / óptima, pode-se afirmar que a velocidade chega à velocidade máxima Vmax



Os três pressupostos são:
  1. um estado estationário (steady state) no qual a concentração do intermediário ES não muda; a formação do complexo ES acontece com a mesma velocidade do que a degradação do mesmo.
  2. Toda enzima presente participa;
  3. O sistema encontra-se num ambiente óptima (saturação com S, o melhor pH, a melhor temperatura); assim a velocidade V chega à velocidade máxima Vmax



a velocidade da formação do intermediário ES:



a velocidade da quebra do intermediário ES (para dois lados):





KM é o constante de Michaelis

Exercício 40
Explique como chegar a esta expressão a partir do pressuposto 1.
Resposta 12-40

KM mostra a afinidade pela enzima ao substrato; um KM baixo implica muito ES, portanto, muito substrato S;
isto é: pequeno KM implica velocidade maior.

A relação entre a velocidade da reacção e KM pode-se ler na equação de Michaelis Menten:



Os valores de KM   podem variar de 0 até milhares

Exercício 41
Leia bem a tarefa prática laboratorial, tente imaginar esta prática e dá o seu comentário:
Divida-se um extracto neutro (pH=7) da mucosa gástrica em duas partes iguais (A e B).
Acidifica-se a parte A com HCl até atingir o pH 2: esta mistura já não mostra actividade de degradação proteica.
Dilui-se a parte B com um volume igual de água: esta mistura não mostra nenhuma actividade.
Tratam-se ambas as partes, A e B, com base, até atingir um pH 8,5: não há nenhuma actividade enzimática de degradação proteica.
Acidificam depois as duas partes de pH 8,5 para atingir pH 2: Só parte B mostra actividade de degradação proteica.”

Exercício 42
Tenta compreender a seguinte descrição duma experiência, junto com os gráficos:
"Na comparação das enzimas, determinam-se os parâmetros de Vmax e Km , medindo a velocidade da reacção (V) em função da concentração do substrato [S]."

Neste caso mede-se, para uma quantidade padrão de hexocinase ou glicocinase, a velocidade da formação (V) de GlucoseFosfato (o produto G6P) em função da concentração de glicose (S).
Os resultados mostram que as Vmax das duas enzimas são iguais (formam-se ±100 nmol G6P por minuto), mas os Km diferem bastante:
Km da hexocinase  = 0,1 mM, Km da glicocinase = 10 nM (factor 100)."

Considere mais uma vez o seguinte equilíbrio, com um intermediário SE:



o constante de Michaelis mostra a afinidade da enzima para o substrato


a equação de Michaelis-Menten mostra a relação entre KM e a velocidade da reacção

Existem vários tipos de inibição das enzimas:
  1. Inibição pelo produto
  2. Inibição por drogas
  3. Inibição alostérica






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